SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FAM123B： 腎母細(xì)胞瘤X蛋白抗體 人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞總RNAHVT NA

T24細(xì)胞，人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 大鼠肝癌細(xì)胞(wistar 大鼠),CBRH7919細(xì)胞 RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 兔白細(xì)胞介素-35(IL-35)ELISA試劑盒 Goat Anti-Guinea IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

FUCA1： α-L巖藻糖苷酶抗體 CD19 Others Mouse 小鼠 CD19 / Leu-12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0456TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 兔白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Guinea IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

FbxW2： FbxW2蛋白抗體 BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 Rattus

Phospho-MEF2A (Thr312)： 0酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0223SW480(人結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠唾液酸酶2(SIAL2)ELISA試劑盒 sCD40L(Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand)  人可溶性CD40配體 96T

Phospho-MEF2A (Ser408)： 0酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3

QG-56(人肺扁平上皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 L-02(正常肝細(xì)胞) 大鼠唾液α1(AMY1)ELISA試劑盒 a-Glu  大鼠α葡萄糖苷酶 96T

phospho-MEK1 (Thr286)： 0酸化原活化蛋白激酶激酶1抗體 小鼠畸胎瘤細(xì)胞;P19

SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino 人型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA 試劑盒 lamin A 核纖層蛋白A抗原 0.5mg

phospho-ITGB4(Tyr1530)： 0酸化整合素β4抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022

OVCAR-3(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人轉(zhuǎn)酶/谷轉(zhuǎn)酶(ALT/GPT)ELISA 試劑盒 LOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體 0.5mg

IGFBP1： 結(jié)合蛋白1抗體 人羊膜上皮細(xì)胞HAmEpiC

CCL21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白 人基轉(zhuǎn)移酶(ALT)ELISA試劑盒 LPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。