NCI-N87人胃癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

LTEP-a-2細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞 猴腎細(xì)胞系,VERO E6細(xì)胞 CM-M050小鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒 ZBTB40： 鋅指蛋白923抗體 CSF1R Others Mouse 小鼠 CSF1R / M-CSFR / CD115 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)基端肽(XⅠ)ELISA試劑盒 ZBTB42： 鋅指蛋白925抗體 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human

NHEK.f-c pooled 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)少年，混合 500,000cells 原代上皮細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1ml 小鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒 ZBTB43： 鋅指蛋白297B抗體 CL-0003293A (人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒 ZBTB46： 鋅指蛋白340抗體 人心肌細(xì)胞 (HCM) (1×106 )

中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒 ZBTB48： 鋅指蛋白855抗體 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2 小鼠支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

大鼠骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠原酶(y)ELISA試劑盒 ADV IgM 腺病毒 IgM 混合型(間接法二步法)

MARVELD1： 候選抑制基因MARVELD1抗體 HCT116, 人結(jié)直腸癌細(xì)胞 垂體瘤,AtT20細(xì)胞 COS-7(非洲青猴腎細(xì)胞)

WIF1 Others Mouse 小鼠 WIF1 / WIF-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 EB-VCA IgG EB 病毒 IgG(間接法二步法)

MTCP1： 成熟T淋巴細(xì)胞增殖蛋白1抗體 人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3

293TN人胚腎細(xì)胞--用于慢病毒包裝 293TN human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM+10%FBS+500ug/ml G418 大鼠原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒 EB-VCA IgM EB 病毒 IgM(間接法二步法)

NCI-N87人胃癌細(xì)胞HPV16 L2： 人瘤病毒16型L2抗體 CL-0324BT-20(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Saos-2細(xì)胞，人成骨肉瘤細(xì)胞 鮮綠青霉 體細(xì)胞;HEL 人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA 試劑盒 Tranthyretin 甲狀腺素運(yùn)載蛋白(抗原) 0.5mg

H7N9 Matrix Protein 1： A型病毒H7N9 M1蛋白抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM933 人堿性0酸酶(ALP)ELISA 試劑盒 rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)  0.1mg

Hirudin： 水蛭素抗體 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T