傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

SCC15人舌鱗癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據(jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

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角膜上皮細胞培養(yǎng)基CEpiCM 小鼠NADPH氧化酶1(NOX1)ELISA試劑盒 SMC1： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1抗體 MFC 小鼠胃癌細胞

Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 真皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠NADH脫氫酶1(ND1)ELISA試劑盒 SMC2： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化))5×106cells/瓶×2

NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠M型肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒 SMC4： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白4抗體 人肺成纖維細胞 (HPF)( 5×105 )

人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN 小鼠Misato同源物1(MSTO1)ELISA試劑盒 SMC5： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體 人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292 大鼠表皮黑色素細胞培養(yǎng)基 100mL

IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠Mdm2小鼠p53結(jié)合蛋白同源物(MDM2)ELISA試劑盒 SMC6： 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體 人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1

食管癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine)  兔子5羥色胺 96T

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HAN(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 雪旺細胞培養(yǎng)基SCM 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA 試劑盒 Beta-EP (Rabbit Beta-Endorphin)  兔子β內(nèi)啡肽 96T

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IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標簽) 大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 Mouse neurofilament protein,NF  小鼠神經(jīng)絲蛋白 96T

SCC15人舌鱗癌細胞SF-295細胞，人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞 毛霉 人腸平滑肌細胞RNAHISMC miRNA5 μg 人抗核仁抗體(ANA)ELISA 試劑盒 Kir6.2 peptide ATP敏感性通道亞基kir6.2抗原 0.5mg

HIRIP3： HIRA相互作用蛋白3抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

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HCC827(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞;CV-1 人抗核抗體(ANA)ELISA 試劑盒 Aurora B 光激酶B抗原 0.5mg