傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

UO-31人腎癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 (phospho T24 + T32)： 0酸化叉頭蛋白家族抗體 T Others Human 人 ansthyretin / T / Prealbumin / PALB 人細胞裂解液 (陽性對照)

Hep G2, 人肝癌細胞系 兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)ELISA 試劑盒 IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗猴IgG 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321)： 0酸化叉頭蛋白3A抗體 細胞名稱 種屬

HHpC-c 人肝細胞(HHpC) 3-6 mio. 人支氣管平滑肌細胞HBSMC 兔子白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser294)： 0酸化叉頭蛋白3A抗體 非洲綠猴腎細胞;CV-1

CL-0353hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠氧化酶(COX)ELISA試劑盒 E2 雌二醇 96T

MCT2： 單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2

NCI-H446(人小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 COLO 205(結(jié)腸癌細胞) 大鼠(Cyt-C)ELISA試劑盒 ET3 游離狀腺原酸T3 96T

MDH1： 可溶性蘋果酸脫氫酶抗體 大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6

IL1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 大鼠(Cyt-C)ELISA 試劑盒 ALDH  大鼠乙醛脫氫酶 96T

UO-31人腎癌細胞HPV18 E6 protein： 人類狀瘤病毒18 E6單克隆抗體 CM-M026小鼠骨髓基質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL

GNM細胞，上頜牙齦癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌 宋氏志賀氏菌 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WML6.0 人單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 試劑盒 HMGA2 (high mobility group A2) 高遷移率族蛋白A2抗原 0.5mg

hnRNP F： 異質(zhì)核糖核蛋白F抗體 CD36 Others Mouse 小鼠 CD36 / GP3B / SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠骨髓瘤細胞;IR983F 人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原 0.5mg

hnRNP K： 異質(zhì)核糖核蛋白K抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0909