傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

IMR-32人神經(jīng)母細胞瘤細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GALNT10： 多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移酶10抗體 小鼠骨髓間充質(zhì)肝細胞(MMSC-bm)(5×105)

人腎皮質(zhì)上皮細胞總RNAHRCEpiC NA 人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA 試劑盒 IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗人IgG 0.1ml

GALNT11： 多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移酶11抗體 雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 小鼠脈絡(luò)膜血管細胞培養(yǎng)基 100mL

CD28 Others Human 人 CD28 / TP44 人細胞裂解液 (陽性對照) 人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA 試劑盒 IgG/APC APC標記的小鼠抗人IgG 0.1ml

GALNT12： 多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移酶12抗體 人虹膜色素上皮細胞cDNAHIPEpiC cDNA

IgG2b Others Mouse 小鼠 IgG2b-Fc 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠酶2(CA-2)ELISA 試劑盒 IL-2(Human Interleukin 2)  人白介素2 96T

Nck1： NCK銜接蛋白1抗體 臺盼藍TB

OP9小鼠骨髓基質(zhì)細胞 OP9 mouse bone marrow somal cells a-MEM培養(yǎng)基+20%FBS 大鼠酶(CA)ELISA試劑盒 cath-K  大鼠組織蛋白酶K 96T

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CL-0111HL-7702(人肝正常細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠酶(CA)ELISA 試劑盒 CR(Mouse Calretinin)  小鼠鈣結(jié)合蛋白 96T

IMR-32人神經(jīng)母細胞瘤細胞ICA1： 胰島細胞自身抗原1抗體 CM-H055人卵巢上皮細胞培養(yǎng)基100mL

EAC細胞，小鼠艾氏腹水癌細胞 R 1610(中國倉鼠體細胞) 鯉魚尾鰭細胞;YZ16 人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒 NTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide) 離子/磺膽酸共轉(zhuǎn)運蛋白抗原 0.5mg

Islet 2： 胰島素基因增強結(jié)合蛋白2抗體 OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人細胞裂解液 (陽性對照)

人絨癌細胞;JEG-3 人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA 試劑盒 Ghrelin 28 腦腸肽28 0.5mg

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