傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

XWLC-05云南宣威肺腺癌細胞系

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CL-0196RKO(人結腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 人結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 FITC FITC標記的兔抗親和素 0.1ml

GIRK2： G蛋白激活內(nèi)流通道蛋白2抗體 A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 Human

HUF Pellet 人子宮成纖維細胞團塊 > 1 mio.cells 人淋巴內(nèi)皮細胞裂解物HLECL 人結合蛋白2(IGFBP2)ELISA 試劑盒 AP 堿性0酸酶(AP)標記的兔抗親和素 0.1ml

GRB10： 生長因子受體結合蛋白10抗體 人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572)

AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2 人結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 試劑盒 Gold 膠體金標記的兔抗親和素 2ml

小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 ACV-A(Human Activin A)  人活化素A 96T

Phospho-NFKBIA (Tyr42)： 0酸化IKB α抗體 Mv.1.Lu細胞，貂肺上皮細胞 人結腸癌細胞,CW-2細胞 CM-H093人顱蓋造骨細胞培養(yǎng)基100mL

TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠腎損傷分子1(Kim1)ELISA試劑盒 NRG-1(human Neuregulin 1)  人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1 96T

phospho-NFKBIA(Tyr305)： 0酸化IKB alpha抗體 狗間充質(zhì)干細胞-脂肪DMSC-ad

WEHI-231小鼠B淋巴細胞 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA 試劑盒 CXCL16  大鼠CXC趨化因子配體16 96T

XWLC-05云南宣威肺腺癌細胞系IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照) 人preptin ELISA 試劑盒 SSTR5 (somatostatin receptor 5) 受體5抗原 0.5mg

Interferon alpha 6： 干擾素α6抗體 牛腎細胞;MDBK

RH-35細胞，大鼠肝癌細胞 HeLa(細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1036 人PL7抗體/抗蘇酰NA合成酶(PL7)ELISA 試劑盒 STAT1(signal transducers and activators of transcription 1) 信號轉導與轉錄激活因子1抗原 0.5mg

CD18： 整合素β2/Integrin β2抗體 EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚腎細胞;293 [HEK-293] 人PL12抗體/抗酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA 試劑盒 phospho-STAT1(p-Tyr701) peptide 0酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗原 0.5mg